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一般來說,ELISA操作技術(shù)員會在一切準(zhǔn)備就緒后開始實(shí)驗(yàn),而在實(shí)驗(yàn)過程當(dāng)時(shí)卻常會出現(xiàn)一些問題。由于ELISA實(shí)驗(yàn)操作步驟復(fù)雜,可能一個(gè)小小的誤差就會出現(xiàn)大問題,那么我們要如何解決并完善實(shí)驗(yàn)步驟的誤差問題呢?今天我司化工有限公司帶給您的資訊主題是:小技巧改變ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差大問題。
①:由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)應(yīng)使用加樣器。
②:閾值附近實(shí)際上是個(gè)灰區(qū),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標(biāo)本進(jìn)行奇數(shù)次復(fù)檢,以次數(shù)多者為準(zhǔn),如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實(shí)際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時(shí)間后再測。
③:肉眼觀察稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)際工作中是難以避免的,肉眼目測結(jié)果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
④:不同的【ELISA試劑盒廠家】產(chǎn)品其生產(chǎn)工藝和操作方法會略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
⑤:加樣時(shí)樣品量誤差,對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值附近的標(biāo)本影響很大,建議校對加樣器。
⑥:反應(yīng)時(shí)間的誤差,做大量標(biāo)本時(shí),*孔和zui后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大
⑦:由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關(guān)。
⑧:臨界值附近標(biāo)本波動為正?,F(xiàn)象,任何ELISA試劑盒均不可避免。可以考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
⑨:若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
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